什么是牛血清白蛋白?

發(fā)布日期:2024-05-21 17:20:06   瀏覽量 :183
發(fā)布日期:2024-05-21 17:20:06  
183

牛血清白蛋白(BSA)是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。

應用: 牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應用,例如在WB實驗中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質的濃度,對酶起保護作用。 防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性減輕不利環(huán)境因素,如加熱、表面張力及化學因素引起的變性。

測定蛋白濃度 按50:1配置BCA工作液。 10ulC液(蛋白標準)+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。 再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標準液加入96孔板的第1~8標準孔中,在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。 分別加PBS定容至20ul。 各孔中加入200ulBCA工作液,室溫放置2小時。 用酶標儀測定蛋白濃度:測定A562,依標準曲線算出蛋白濃度。

SDS-PAGE電泳
1、制膠:按比例配制分離膠,緩緩地搖動溶液,使激活劑混合均勻,將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃極中,再在液面上小心注入一層水,以阻止氧氣進入凝膠溶液中,靜置40min。 同前按比例配制濃縮膠,但混勻溶液時不要過于劇烈以免引入過多地氧氣。 吸去不連續(xù)系統(tǒng)中下層分離膠上的水分,連續(xù)平穩(wěn)的注入凝膠溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡,靜制60min以上以保證完全聚合。
2、預電泳:將聚合好的凝膠安置于電泳槽中,小心拔去梳子,加入電泳緩沖液后低電壓10-20V的預電泳20-30min。 (目的是清除凝膠內的雜質, 疏通凝膠孔徑以保證電泳過程中電泳的暢通)。
3、樣品準備:首先計算上樣體積,然后按樣品上樣buffer=4:1的比例加入上樣bufer混勻,沸水10分鐘,冰上5分鐘。
4、加樣:預電泳后依次加入標準品(Marker)和待分析樣品。 (加樣時間要盡量短,以免樣品擴散,可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應。每個泳道加5ul 。)
5、電泳:加樣完畢,選擇80V恒壓進行電泳,電泳直至溴酚藍染料前沿到達兩膠交界處(一般約20分鐘),更換至100V恒壓電泳,電泳直至溴酚藍染料前沿下至凝膠末端處,即停止電泳(一般約為1小時20分鐘)。

*以上內容來自網(wǎng)絡

公司 浙江聯(lián)碩生物科技有限公司
關注公眾號
客服小徐
免責聲明:本站部分資訊、圖片來源于網(wǎng)絡及網(wǎng)友投稿,如有侵權請及時聯(lián)系客服,我們將盡快處理。
版權所有:浙江聯(lián)碩生物科技有限公司
云計算支持 反饋 樞紐云管理
主站蜘蛛池模板: 幸福宝隐藏入口最新章节免费阅读小说 | 新梅瓶4在线观看dvd| 亚洲一区爱区精品无码| 青青青爽在线视频观看| 国产美女精品视频免费观看| 一区二区三区无码视频免费福利| 日本不卡高字幕在线2019| 交换配乱吟粗大SNS84O| 老阿姨哔哩哔哩b站肉片茄子芒果| 国产无遮挡又黄又爽高潮| 777四色米奇欧美影院| 天天综合天天综合| 一级毛片a女人刺激视频免费| 欧美一级视频在线| 亚洲精品午夜国产va久久成人| 精品国产v无码大片在线看| 国产一级理论免费版| 88国产精品视频一区二区三区| 日日碰狠狠添天天爽超碰97| 亚洲第一福利网站| 精品一区二区三区在线观看视频| 国产一区二区影院| 四虎永久在线日韩精品观看| 国产边摸边吃奶叫床视频| 久久午夜夜伦鲁鲁片无码免费 | 中日韩精品电影推荐网站| 男女污污视频在线观看| 国产国语一级毛片全部| 2020亚洲欧美日韩在线观看| 夭天曰天天躁天天摸在线观看| 中文字幕日韩精品一区二区三区 | 老熟女高潮一区二区三区| 国产成人一区二区三区精品久久| 中国精品白嫩bbwbbw| 日韩欧美亚洲每的更新在线| 动漫人物将机机桶机机网站 | 一区视频免费观看| 我要看真正的一级毛片| 久久人人爽爽爽人久久久| 最近中国日本免费观看| 亚洲婷婷第一狠人综合精品 |