大鼠胰島素細(xì)胞的應(yīng)用

背景

大鼠胰島素細(xì)胞源自大鼠胰島組織，胰島素陽性，可合成胰島素原I和II，可用于胰島β細(xì)胞功能研究。

胰腺的內(nèi)分泌部分，是分散在胰腺中的不規(guī)則的細(xì)胞群。胰島至少有三種細(xì)胞：A(或a2)細(xì)胞分泌胰高血糖素；B(或β)細(xì)胞分泌胰島素；近來又發(fā)現(xiàn)一種細(xì)胞，稱為D(或δ或α1)細(xì)胞，它在正常情況下分泌生長激素釋放抑制激素。D細(xì)胞增生或發(fā)生腫瘤時，分泌大量胃泌素，稱為胃泌素瘤。可引起胃酸分泌過多的消化性潰瘍。胰島這些細(xì)胞緊靠在毛細(xì)血管上，所分泌的激素，通過毛細(xì)血管壁滲入血液內(nèi)，有調(diào)節(jié)糖代謝的作用。

B細(xì)胞(β細(xì)胞)，約占胰島細(xì)胞的60%～80%，分泌胰島素，胰島素可以降低血糖。缺乏胰島B細(xì)胞將導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生。

A細(xì)胞(α細(xì)胞)，約占胰島細(xì)胞的24%～40%，分泌胰高血糖素，胰高血糖素作用同胰島素相反，可增高血糖。

D細(xì)胞(δ細(xì)胞)，約占胰島細(xì)胞總數(shù)的6%～15%，分泌生長抑素。

胰高血糖素是一種由胰島細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)激素，它與胰島素一起發(fā)揮作用來調(diào)節(jié)血糖的水平。當(dāng)血糖（葡萄糖）濃度低時，胰高血糖素刺激肝臟將儲存的糖原轉(zhuǎn)化為葡萄糖，并立即釋放到血流中，以此來升高血糖的濃度。胰高血糖素還可以增加肝臟中蛋白質(zhì)生成葡萄糖的速率。

應(yīng)用

探討mi R-126在原代分離培養(yǎng)的正常SD大鼠胰島β細(xì)胞胰島素信號通路中的調(diào)控作用及其對胰島β細(xì)胞凋亡的影響。

方法:以原代分離培養(yǎng)的正常SD大鼠胰島β細(xì)胞為模型,轉(zhuǎn)染合成的mi R-126模擬物（mi R-126 mimic）或mi R-126抑制劑（mi R-126 inhibitor）,干預(yù)mi R-126的表達(dá),并用流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞凋亡率。

轉(zhuǎn)染后的大鼠胰島β細(xì)胞用胰島素（100nm）刺激12小時,提取細(xì)胞的總RNA,用熒光定量PCR技術(shù)以U6及β-actin為內(nèi)參基因檢測mi R-126、IRS-1、IRS-2的相對表達(dá)量;提取細(xì)胞總蛋白進(jìn)行BCA蛋白測定,用western Blot技術(shù)檢測IRS-1/2,Akt,PIK3R2蛋白表達(dá)量。

結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示:mi R-126 mimics、mi R-126 inhibitor、negative control轉(zhuǎn)染效率較高;mi R-126 mimic組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡數(shù)顯著高于NC組和mi R-126inhibitor組（P<0.05）;熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示:mi R-126 mimic組大鼠胰島β細(xì)胞IRS-1/2相對表達(dá)量較NC組和mi R-126 inhibitor組顯著降低（P<0.05）;Western blot結(jié)果顯示:mi R-126 mimic組大鼠胰島β細(xì)胞IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2蛋白表顯著受到抑制。

結(jié)論:過表達(dá)mi R-126可能通過調(diào)控胰島素信號通路中IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2表達(dá)參與胰島素抵抗。2.過表達(dá)mi R-126可誘導(dǎo)大鼠胰島β細(xì)胞凋亡。

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