組織冰凍切片包埋劑

使用前標本準備：

冰凍切片標本可采用 (1) 新鮮組織，特點是快速，但未用完的包埋組織塊不能保存；(2) 使用經典方法10%甲醛或4%多聚甲醛室溫2~10分鐘固定過的組織，優點是既不影響后續步驟，包埋組織塊又可長期冰凍保存，隨時再用，缺點是步驟稍繁。(3) 培養細胞，800g離心10分鐘收集培養細胞，用吸頭或針頭撥出細胞沉淀塊，放入OCT包埋劑內。

應避免采用降低組織冰點的甲醇乙醇固定。本產品說明書不提供關于組織取材、滲透、固定、冰凍切片等技術信息。用戶應閱讀冰凍切片機操作手冊，參考各種常規技術方法。

使用方法：

1. OCT包埋：用水或PBS沖洗固定的組織塊，用吸水紙吸去液體。在盛標本的包埋模子內，擠出適量的包埋劑，放入組織和細胞沉淀塊，加包埋劑完全埋沒組織塊。可用2層鋁箔紙折疊成簡易的模子。如有氣泡可用針頭或吸頭吸出。

2. 冰凍：將盛有組織細胞和包埋劑的模子，正置于切片機冷室內冰凍10分鐘。此時，包埋劑為乳白色固體。包埋劑和組織冷凍時體積略有膨脹，因此模子應正置，由底部向頂部進行冰凍。也可將OCT包埋的組織置于干冰或液氮，或放入－40~－70 ºC冰箱冰凍固化保存，用前取出置于切片機冷室內平衡溫度(否則損壞刀)。

3．切片：可在切片機的組織卡盤(chuck)上加少許包埋劑并在其固化前嵌入組織塊，然后再于組織周圍加入少許包埋劑使其穩定。進行常規切片，厚度范圍2~100 µm。

4. 收片后，用適量水或PBS沖洗切片3次，每次2−3分鐘，洗除包埋劑。而后可進行常規組化染色、病理染色、原位雜交。未用完的組織塊可冷凍儲存。

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