抗體保存妙招

一、保存溫度和條件

很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于-20°C或-80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小，同時可避免多次在一個管內取樣而由槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體，融解一次后剩余抗體應保存于4°C。收到抗體后，應10,000 x g 離心20秒，使管口螺紋內的抗體溶液全部離心至管底，用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗的使用量。分裝量不能少于10μl；分裝量越少，由于蒸發和吸附于管內壁而引起的損失會越大。

除了腹水液含蛋白酶應立即凍存外，大多數抗體接收后可在4°C保存一至兩周，隨后可凍存以長期保存。同樣，應按照說明書推薦的條件進行保存。

二、特殊情況

1、酶聯抗體，不應凍存，4°C可保證穩定。凍融會降低酶的活性，同時影響抗體的吸附能力。

2、偶聯標記的抗體，無論是標記的熒光染料、酶還是生物素，都應保存于深色的管內并包裹上鋁箔。如果暴露在光線下可能會減弱偶聯標記物的活性。熒光標記物尤其容易受到光漂白作用，整個實驗過程中均應避光。

3、免疫球蛋白G3同種型抗體凍融后易形成聚合物，因此應一直保存于4°C。

4、用疊氮化鈉防止污染

為防止微生物污染，在抗體溶液中應加入疊氮化鈉，終濃度為0.02%（質量百分比）。

5、什么時候不能用疊氮化鈉

如果用抗體標記活細胞，或用于體內實驗，確保所用制劑中不含疊氮化鈉。這種抗生素對大多數有機體都有毒性：會阻斷細胞色素電子傳遞系統的信號。

疊氮化鈉會干擾胺基的偶聯標記，應在進行標記之前將其除去。標記后抗體可保存于疊氮化鈉，也可用不含胺基的硫柳汞替代。疊氮化鈉可用透析或凝膠過濾法從抗體溶液中除去。免疫球蛋白 G的分子量是150,000 kDa（免疫球蛋白M的分子量是600,000 kDa），疊氮化鈉的分子量是65道爾頓。使用14,000 kDa的微量透析裝置，隨著疊氮化鈉的擴散，抗體將保留。將帶有燒杯的磁力攪拌器置于4°C攪拌透析裝置6小時 , 每毫升抗體溶液要用至少1升的磷酸鹽緩沖液。更換2次磷酸鹽緩沖液，每次均攪拌至少6小時。如果可以的話，所有材料均要求無菌，所有溶液都應無菌配制。

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