冰凍切片包埋劑制備注意事項(xiàng)分享

操作步驟

1、冰凍制片組織常規(guī)取材。

2、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分。

3、在冷凍切片機(jī)里預(yù)冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑。

4、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。

5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃)，待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘。

6、將組織托夾入切片夾頭，進(jìn)行切片。

7、切片完成后可將組織托置于室溫下 3-5 分鐘解凍后變軟，用水將包埋劑沖洗干凈。

8、將組織放入包埋盒，浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進(jìn)行組織固定。

結(jié)果

1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織，冷凍后包埋劑和組織變白，硬度適宜，切片平整。

2、包埋效果不良:包埋劑過多導(dǎo)致溢出組織托外圍、包埋劑過少不能有效支撐組織或冷凍錘溫度不夠低導(dǎo)致冷凍速度過慢引起組織偏軟，不能切片。

注意

1、冷凍切片組織包埋劑到達(dá)最佳切片硬度所要求的溫度區(qū)間為-10℃ - -30℃，溫度過高質(zhì)軟不能切片，溫度過低切片會(huì)出現(xiàn)碎裂現(xiàn)象。

2、組織脫水前需要將組織表面殘留的冷凍切片組織包埋劑充分洗凈，避免包埋劑進(jìn)入脫水流程。

3、冷凍切片貼片固定后不水洗就進(jìn)入蘇木素染色流程，切片中殘留包埋劑將會(huì)與蘇木素染色液結(jié)合，出現(xiàn)非特異性蘇木素染色。

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