1. 操作前,要保證所有的用品無菌,移液槍槍頭、離心管、培養(yǎng)瓶、PBS、培養(yǎng)基、血清等。 高壓滅菌,一般要提前一天高壓滅菌,滅菌結(jié)束后放烘箱烘干,為確保充分烘干,一般需要過夜。要確保一定被高壓過,像我們實(shí)驗(yàn)室就發(fā)生過沒被高壓的槍頭盒放烘箱里了,從高壓鍋里拿瓶子時(shí)一定要擰緊瓶蓋,否則就白壓了。
2.操作前紫外燈照射超凈臺(tái)20min左右。實(shí)驗(yàn)前打開超凈臺(tái)的通風(fēng),用酒精棉球?qū)⑴_(tái)面擦一遍,所有進(jìn)入超凈臺(tái)的東西都要噴酒精。
3.操作時(shí),所有的玻璃瓶打開前都需在酒精燈上烤一圈,畢竟“病從口入”嘛,將瓶蓋放在左側(cè)(清潔區(qū)),保證操作時(shí)不會(huì)從上方經(jīng)過。
4.操作時(shí)注意槍頭,做到懸空加樣,尤其是給非無菌的離心管里加?xùn)|西,給含有細(xì)胞的皿里加?xùn)|西,如你從玻璃瓶里給一個(gè)含有細(xì)胞的培養(yǎng)皿里加培養(yǎng)基,那么你的槍頭就不能伸到培養(yǎng)皿的液體里,否則你的培養(yǎng)基就污染了,除非你每次換槍頭。
5.注意袖口,胳膊,切記不要從打開的瓶,皿上面越過,防止落菌。
6.手拿所有的蓋子時(shí),一定不要碰到里面。
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用酒精燈燒所有的瓶口、蓋子,擰緊,用封口膜封好,我們的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里。
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