細胞培養如何選到無菌耗材避免細菌污染

養細胞的人最最怕的就是細胞污染，細胞一污染，一夜回到解放前，一切都得從頭開始，尤其是新手小白，幾乎都逃不過細胞污染的魔咒。    避免細胞污染，最重要的是操作前和操作時。   

1.  操作前，要保證所有的用品無菌，移液槍槍頭、離心管、培養瓶、PBS、培養基、血清等。     高壓滅菌，一般要提前一天高壓滅菌，滅菌結束后放烘箱烘干，為確保充分烘干，一般需要過夜。要確保一定被高壓過，像我們實驗室就發生過沒被高壓的槍頭盒放烘箱里了，從高壓鍋里拿瓶子時一定要擰緊瓶蓋，否則就白壓了。   

2.操作前紫外燈照射超凈臺20min左右。實驗前打開超凈臺的通風，用酒精棉球將臺面擦一遍，所有進入超凈臺的東西都要噴酒精。     

3.操作時，所有的玻璃瓶打開前都需在酒精燈上烤一圈，畢竟“病從口入”嘛，將瓶蓋放在左側（清潔區），保證操作時不會從上方經過。   

4.操作時注意槍頭，做到懸空加樣，尤其是給非無菌的離心管里加東西，給含有細胞的皿里加東西，如你從玻璃瓶里給一個含有細胞的培養皿里加培養基，那么你的槍頭就不能伸到培養皿的液體里，否則你的培養基就污染了，除非你每次換槍頭。     

5.注意袖口，胳膊，切記不要從打開的瓶，皿上面越過，防止落菌。

6.手拿所有的蓋子時，一定不要碰到里面。

7.實驗結束后，用酒精燈燒所有的瓶口、蓋子，擰緊，用封口膜封好，我們的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里。

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