膠原酶I型的配置方法

膠原酶儲存液的配制：

向每管100mg的膠原酶中加入100µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡鹽溶液,含Ca2+、Mg2+)，輕輕旋渦震蕩使其充分溶解，制備成1g/ml(即1000×)的儲存液。

然后用低蛋白結合性的0.22μm的濾膜過濾除菌，分裝成小份量，然后于-20℃避光凍存。

使用前于冰上解凍，避免反復凍融。

膠原酶工作液的配制：

根據需要的濃度，將膠原酶I型溶解在適當的溶劑中，如DMEM或PBS。

對于I型膠原酶，一般使用濃度為0.075%至0.1%。

如果使用DMEM作為溶劑，可以按照以下步驟操作：

約5ml DMEM加入膠原酶的玻璃瓶中，吹打使其溶解，移入50ml離心管。

補DMEM至36ml，再加入4ml FBS，混勻。

然后分裝每10ml一管，于-20度保存。

如果用于脂肪消化，可以使用以下濃度和步驟：

計算所需的酶量，例如0.75mg/ml PBS。

準確稱取所需量的膠原酶，加PBS溶解。

搖勻后，通過濾器過濾，即可使用。

在37度下消化30-40分鐘。

注意：具體的配置方法可能會根據實驗需求和所使用的膠原酶I型產品的說明進行調整。

在使用前，應仔細閱讀產品說明書，并遵循制造商的建議進行操作。

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