ELISA實驗結果如何計算

作為ELISA實驗的最后一步，檢測結果的計算對整個實驗十分重要。

我們以夾心法為例，來介紹ELISA實驗結果計算。

● ELISA的樣本通常要設置1~2個復孔進行檢測，分別求出標準品、實驗組樣本吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應超出平均值的20%；

● 樣本的OD（吸光度）平均值要減去標準品濃度為0時的OD平均值；

● 建立標準曲線：在對數坐標圖上擬合四參數的邏輯函數曲線（X軸上為標準品濃度，Y軸為對應的OD值）

詳細步驟如下：

第一步：輸入標準品濃度和OD值

第二步：選擇擬合曲線類型——非線性曲線擬合

選中輸入的數值框，按如下操作依次點擊選項。

第三步：選擇Statistics和Logistic，勾選“Find X from Y”

完成上述操作后，點擊Fit按鍵，擬合曲線和相關信息將自動生成。

第四步：查看標準曲線信息（如參數值，R-Square等）

第五步：修改橫縱坐標標題，設置坐標軸類型為對數

雙擊第四步中的擬合曲線圖，對其進行編輯。雙擊修改橫縱坐標的標題，雙擊X軸、Y軸，設置坐標類型為“Log10”，并設置橫縱坐標范圍。

第六步：根據標準曲線計算樣品濃度

選擇第四個工作表（Fit NL Find X from Y1），在左列輸入樣本的OD值，對應的濃度將在右列自動生成。

注意：

如果樣本的OD值超出標準曲線的上限，請在實驗前適當稀釋樣本，以獲得精確結果。分析數據時，樣本實際濃度應為標準曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數。

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