PVDF膜轉印膜如何使用

PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質印跡法中常用的一種固相支持物。
PVDF本質是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會浸濕，為了在水性緩沖液和系統中使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中。
PVDF膜在使用時需預處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結合。
甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。
隨著膜的外觀從不透明到半透明，完全浸濕是顯而易見的。之后必須用水反復沖洗以去除醇類，經預處理的膜可以直接放入轉印緩沖液中平衡。
一旦膜被浸濕，蛋白結合可通過蛋白與膜的接觸而實現。
由于蛋白與膜的結合貫穿整個膜的厚度(深度)，結合能力是由孔的內部表面積來決定的，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結合就越牢固。
0.2um PVDF膜內部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。

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