1、主要懷疑點:洗板不充分:
1.1、機器洗版:確保機器設(shè)置的針頭能吸干孔中液體,并且加液針頭能加液大于350ul,加液針頭沒有被異物或者結(jié)晶鹽堵住。
1.2、手動洗板,嚴格按照步驟,使用干凈滅菌的槍頭和加樣槽,使用無氧化劑的吸水紙。加350ul洗液,靜置90秒,在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑。
1.3、特別注意,在加入TMB前的洗板步驟極其重要,殘留的HRP酶會直接導致TMB顯色。
2、次要懷疑點:
2.1、TMB 已經(jīng)污染,檢測TMB是否透明無色,如果偏藍就是污染了。
2.2、檢查配制洗液的水是否污染,要求使用的水是雙蒸水,三蒸水或無離子水,水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬,以及HClO都會氧化TMB。
2.3、酶標板受潮,長霉,或者試劑過期。
2.4、環(huán)境污染,空氣中有導致顯色的物質(zhì)或者粉塵。
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