1、速凍是冰凍切片的關鍵,因為只有速凍才能減少組織內的冰晶,最好的辦法就是將速凍頭迅速壓在組織上,切好后就可以凍片,特別適用于較脆的組織。
2、固定切片后應立即放入甲醇冰醋酸中固定,不能等切片干后再固定,后者容易造成細胞退變。固定液有很多種,甲醇作用快、收縮小、染色較清晰,是冰凍切片最理想的固定液,而每97ml加入冰酸醋3ml,會減少某些膠質、鈣質較多的組織不容易掉片。
3、包埋劑可用普通膠水代替,但要加入適量的水(膠水與水的比例大約在2:1)。
太稀了容易損傷切片刀,太稠了黏在刀上不容易洗掉,影響切片的質量。
4、冰凍用切片刀不僅要磨得快,而且要磨得直,否則切出來的片子就會不平整,不能進入抗卷板(最好使用一次性刀片)。
5、如組織發脆,可以等幾分鐘后再切,也可用手在組織上稍微加溫;如果用手去摸組織塊,最好戴手套,或用玻片間的紙夾在手與組織之間,以防感染。
6、冷凍室的室溫冬天一般設置在-19℃左右,夏天設置在-22℃左右。
不同的組織有不同的溫度要求,如肝臟、甲狀腺組織溫度應設置在-15℃左右,脂肪組織一般設置在-35℃以下。
7、冷凍切片機應長期處于恒溫冷凍狀態,經常的開關電源容易造成設備損壞。
*以上內容來自網絡
友情鏈接:
上海聯碩官網